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來源：蘇州邁萊柏系統工程有限公司發布時間(jian)2021.09.16
無菌操作區
無菌(jun)操作(zuo)區是只限于細胞培養(yang)及其他(ta)無菌(jun)操作(zuo)的(de)區域(yu)，最好(hao)能(neng)與(yu)外界隔離，不能(neng)穿行或受其他(ta)干擾(rao)。在一般環境的(de)空氣(qi)中，由于存在許多塵埃(ai)和雜菌(jun)，較(jiao)易造成污染。
因此，接種工作要在空氣(qi)經過滅(mie)菌(jun)的環境里進行，小規模的無(wu)菌(jun)環境可利用超(chao)凈(jing)工作臺創造，大規模的需建(jian)無(wu)菌(jun)室。
理想的無菌操作室應劃為三部分∶
1、更衣室：供更換衣服、鞋子及穿戴帽子和口(kou)罩。
2、緩沖間(jian)(jian)：位于(yu)更衣間(jian)(jian)與操(cao)作(zuo)(zuo)間(jian)(jian)之(zhi)間(jian)(jian)，用(yong)于(yu)準(zhun)備工作(zuo)(zuo)，還有(you)防止污染(ran)的作(zuo)(zuo)用(yong)，以(yi)保證操(cao)作(zuo)(zuo)間(jian)(jian)的無菌環境，同時可放置恒溫培養箱以(yi)及必(bi)需的小型儀器。
3、無(wu)(wu)菌操作(zuo)(zuo)間(jian)：無(wu)(wu)菌操作(zuo)(zuo)間(jian)則專用(yong)于無(wu)(wu)菌操作(zuo)(zuo)、細胞(bao)培養，其大小要適當，且其頂部不(bu)宜(yi)過(guo)高以(yi)保證(zheng)紫外線(xian)的滅菌效果﹔墻壁光(guang)滑(hua)無(wu)(wu)死角以(yi)便清洗和消(xiao)毒(du)，無(wu)(wu)菌操作(zuo)(zuo)間(jian)容積小且為密(mi)閉式，一般無(wu)(wu)菌操作(zuo)(zuo)間(jian)的空氣消(xiao)毒(du)用(yong)紫外線(xian)燈，有的實驗室使用(yong)無(wu)(wu)臭氧紫外線(xian)消(xiao)毒(du)器或(huo)電子消(xiao)毒(du)滅菌器。
凈(jing)(jing)化(hua)工(gong)作(zuo)臺∶操作(zuo)簡(jian)單，安(an)裝方便，占用(yong)空間(jian)小(xiao)且凈(jing)(jing)化(hua)效(xiao)果(guo)很(hen)好。一般(ban)細(xi)菌培養室(shi)使用(yong)的(de)凈(jing)(jing)化(hua)工(gong)作(zuo)臺主要(yao)有兩種：（a）側流式或(huo)稱垂直式（b）外(wai)流式或(huo)稱水平層流式。
孵育區
孵(fu)(fu)育區(qu)也(ye)稱培養區(qu)，本(ben)區(qu)對無菌(jun)的要求雖不比無菌(jun)區(qu)嚴格，但仍需(xu)清潔(jie)無塵，因此也(ye)應(ying)設置在干擾少而(er)非來往穿(chuan)行的區(qu)域。孵(fu)(fu)育可(ke)在孵(fu)(fu)箱或可(ke)控制溫度(du)的溫室中進行，后者(zhe)費用高，一(yi)般實驗室多采用孵(fu)(fu)箱進行工作。
制備區
制備(bei)(bei)區主要(yao)進行(xing)培(pei)(pei)養液(ye)及有(you)(you)關培(pei)(pei)養用的(de)液(ye)體(ti)等(deng)的(de)制備(bei)(bei)。應設有(you)(you)試劑(ji)柜、器械柜、實驗臺和上水(shui)道、電(dian)源等(deng)，配備(bei)(bei)的(de)主要(yao)儀器設備(bei)(bei)有(you)(you)水(shui)純化裝置、天平、微波爐、pH計、抽氣泵(beng)、電(dian)爐、培(pei)(pei)養分裝器、各(ge)種規格的(de)培(pei)(pei)養瓶、培(pei)(pei)養皿、移液(ye)管、燒杯、量筒、容量瓶等(deng)。
在有(you)天(tian)平、pH計、磁力拌器(qi)等設備(bei)下完成制(zhi)備(bei)以(yi)后(hou)，應在無(wu)菌操作臺(tai)進行(xing)過濾除菌。液(ye)體制(zhi)備(bei)直(zhi)接關(guan)系組織細胞養的成敗，因此必須嚴格無(wu)菌操作。
儲藏(zang)區主要存放各類冰箱、干燥箱、液(ye)氫(qing)罐、無(wu)菌培養液(ye)、培養瓶(ping)等，此(ci)環境也需要清(qing)潔無(wu)塵。為了保存細胞(bao)，特別是不易獲得的突變型細胞(bao)或細胞(bao)株，要將細胞(bao)凍存。凍存的溫(wen)度一般(ban)為液(ye)氫(qing)溫(wen)度-196℃。
細胞的凍存過程需要一(yi)系列程序降溫(wen)，一(yi)般為4℃下存放30min。轉放-20 ℃ 1 h，再轉入(ru)-80~-70℃過夜，之(zhi)后才可以轉移到液氫內(-196℃)。因(yin)此儲存區必須(xu)配備(bei)冰(bing)箱(xiang)(xiang)、低(di)溫(wen)冰(bing)箱(xiang)(xiang)、超低(di)溫(wen)冰(bing)箱(xiang)(xiang)和液氫罐等設備(bei)。
清潔和消毒滅菌區
清(qing)潔和消毒(du)滅菌區(qu)應(ying)與其他區(qu)域分開，主要進行(xing)所有細胞培養器皿的清(qing)洗(xi)、準(zhun)備、消毒(du)及三蒸水制備等工作，應(ying)備有高壓蒸汽滅菌鍋(guo)、細菌過濾設(she)備、電熱干燥(zao)箱、消毒(du)柜(ju)、排風設(she)備等。
細胞實(shi)驗室的建設(she)要求
環境要求(qiu)
溫度(du)：儀器還是操作對溫度(du)(du)沒有特殊要求，維持舒(shu)適的溫度(du)(du)即可(ke)，比如18~26度(du)(du)。
濕度：過高(gao)的濕度會導(dao)致(zhi)微(wei)生物的滋(zi)生，所以建(jian)議正常維持濕度在70%以下。
潔(jie)凈度：細胞(bao)實驗對潔凈(jing)(jing)(jing)區(qu)并(bing)沒有要(yao)(yao)求(qiu)，細胞(bao)實驗里面只有細胞(bao)操作(zuo)的時(shi)候要(yao)(yao)求(qiu)無菌的環境，這時(shi)要(yao)(yao)求(qiu)有局部的百級，通(tong)常可以利用超凈(jing)(jing)(jing)臺(tai)(tai)或者生物安(an)全(quan)柜來(lai)實現，不過(guo)(guo)有時(shi)候為了有個更(geng)(geng)好(hao)一點的環境，減小超凈(jing)(jing)(jing)臺(tai)(tai)過(guo)(guo)濾器更(geng)(geng)換的時(shi)間，會維持室內的潔凈(jing)(jing)(jing)度，比如萬(wan)級的潔凈(jing)(jing)(jing)度。
無(wu)菌無(wu)毒的操作環境(jing)(jing)和培養環境(jing)(jing)是(shi)保證細(xi)(xi)胞(bao)(bao)在(zai)體(ti)外培養成功的首要(yao)條(tiao)件(jian)。細(xi)(xi)胞(bao)(bao)培養對(dui)無(wu)菌環境(jing)(jing)要(yao)求很高，在(zai)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)操作時，一般需要(yao)在(zai)100級(ji)空氣質量條(tiao)件(jian)下進行(xing)。
在體外(wai)培養的細胞由(you)于缺(que)乏對微生(sheng)物和(he)有(you)毒物的防御(yu)能(neng)力(li)，一旦被微生(sheng)物或(huo)有(you)毒物質污染，或(huo)者(zhe)自身代(dai)謝物質積累(lei)，可導(dao)致細胞中毒死亡。
照(zhao)明(ming)︰滿足實驗用的(de)操(cao)作照度，通常在300LUX。
維護結構要求
雖然實驗的操作對大環境沒有特殊要求，不過最(zui)好(hao)(hao)能(neng)(neng)有不產塵、不積塵的環境，能(neng)(neng)保證室(shi)內(nei)的清潔，并且易于清洗、不容易滋生微生物，所以在(zai)選擇維護結構時，選用彩鋼(gang)板、醫療板等潔凈板材是比較好(hao)(hao)的選擇，為了保證室(shi)內(nei)的通透性，可以布(bu)置(zhi)密(mi)閉(bi)窗。
消毒(du)
通常做完實驗后，都需要做終末消毒，室(shi)內需要安(an)裝紫外燈，利(li)用紫外燈對空氣和表面消毒。
細(xi)胞實驗室建設的注意事項
1、放置細胞培(pei)養(yang)的(de)實驗室(shi)，空調需(xu)要(yao)能保證在(zai)冬季能制冷，特別是在(zai)密(mi)閉的(de)環境里，培(pei)養(yang)箱等設備的(de)散熱量會比較大，導致室(shi)內溫度(du)過高。
2、如果設計(ji)成(cheng)凈(jing)(jing)(jing)化實(shi)驗(yan)(yan)室(shi)(shi)，就需(xu)要按凈(jing)(jing)(jing)化實(shi)驗(yan)(yan)室(shi)(shi)的(de)(de)要求去(qu)做，如果做的(de)(de)細胞涉及到生物(wu)安(an)全(quan)(quan)，則必須按照(zhao)生物(wu)安(an)全(quan)(quan)實(shi)驗(yan)(yan)室(shi)(shi)去(qu)設計(ji)，具體根(gen)據所做實(shi)驗(yan)(yan)的(de)(de)種類(lei)，來確(que)定(ding)實(shi)驗(yan)(yan)室(shi)(shi)的(de)(de)設計(ji)要求以及選擇的(de)(de)設備，是(shi)選擇超凈(jing)(jing)(jing)工作臺還是(shi)生物(wu)安(an)全(quan)(quan)柜。
3、從事臨床(chuang)細胞治療(liao)的，需要(yao)按(an)照(zhao)具體的規范要(yao)求建設。
